【摘要】 目的 探讨TMSG1在胃癌中的表达与临床病理因素及预后的关系。 方法 采用免疫组化SP法检测胃癌及胃良性疾病的TMSG1的蛋白表达，分析与临床病理因素的关系，并完成术后的长期随访。结果 TMSG1的蛋白表达与患者的淋巴结转移，肿瘤分期密切相关（P<0.05），而与患者的年龄、肿瘤的大小、肿瘤的分级及肿瘤的类型无关（P>0.05），且TMSG1表达阳性患者的总生存期及无病生成期都明显高于阴性患者（P<0.05），多因素COX分析提示TMSG1是患者的一个独立的预后因素。结论TMSG1在胃癌的疾病进展中起到非常重要的作用，是分析胃癌患者的一个预后指标。
【关键词】 TMSG1；胃癌；预后
胃癌是常见的恶性肿瘤，近年来发病率逐年升高。胃癌的复发与转移是疾病进展及胃癌患者死亡的主要原因。胃癌的发生发展是一个多基因、多阶段的变化过程，涉及到多种癌基因的激活和抑癌基因的失活。TMSG1（tumor metastasis suppressor gene 1，肿瘤转移抑制基因1）是近年来新发现的新型的肿瘤抑制基因。TMSG1已经被证实在前列腺癌，宫颈癌，肝癌中TMSG1的表达与疾病的浸润，转移明确相关[1，2]，但在胃癌中的生理功能及临床意义目前尚不十分明确，本文旨在探讨TMSG1的表达与胃癌患者的临床病理因素及预后的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 回顾性随机选取霍山县中医院普外科2006年3月到2008年3月确诊的81例胃癌患者为研究对象，患者年龄29～69岁，平均55岁。临床分期：I+ II期40例、III期41例。病理类型：腺癌68例、其它类型癌13例。手术前检查（胸片，B超）未发现远处转移，以上病例均未接受过放疗、内分泌治疗及化疗，心肺肝肾功能均正常。另外选择20例胃良性疾病标本作为对照。
1.2 免疫组化染色 81例胃癌组织蜡块均行4μm连续切片，分别作HE和免疫组织化学染色。鼠抗人单克隆抗体TMSG1抗体等相关试剂均购自福州迈新公司。免疫组化染色按照说明书步骤进行。经DAB显色后，苏木精复染，中性树胶封片。用已知阳性切片作阳性对照，PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判定
TMSG1的判定以胞质内有棕黄色或棕褐色细颗粒为阳性表达，选取5个高倍镜（×400）视野做阳性细胞计数，阳性细胞数≤10%为阴性，>l0%为阳性。
1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0软件包进行统计学分析，计数资料采用χ2或Fisher检验；所有患者随访至2012年12月，以60 个月为界进行5 年生存率分析，不同组间用LogRank 检验，采用KaplanMeier法绘制生存曲线，以P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 TMSG1蛋白在胃癌中的表达 TMSG1蛋白在胃癌中的表达主要定位于细胞浆中，呈现出棕黄色的颗粒，TMSG1蛋白在胃癌中的表达为46.9%（38/81），而在胃良性疾病中的表达高80%（16/20），TMSG1在胃癌中的表达较良性疾病明显下降（χ2=7.06，P=0.008）。
2.2 TMSG1的蛋白表达与胃癌患者的临床病理因素的关系 本组研究病例的结果提示，TMSG1的表达与患者年龄、肿瘤大小，病理类型及组织学分级无关（P>0.05），而与淋巴结转移及肿瘤的分期密切相关（P<0.05），见表1。2.3 TMSG1的表达在胃癌患者预后中的意义 TMSG1的表达与患者的总生存期（OS）明显相关，TMSG1阳性组患者的总生存期明显高于阴性组患者（P=0.0277， logrank 检验），且TMSG1阳性组患者的无病生成期也明显高于阴性组患者（P= 0.0297， logrank 检验）。在多因素Cox回归分析中可见TGSM1的缺失或减少及肿瘤的分期是肿瘤复发或转移的一个独立预后因素（P= 0.025，P= 0.007）。
3 讨论
胃癌的发生发展是一个多因素多步骤的过程，而体内一些基因表达的改变导致细胞生长调控的失调是胃癌发生过程中一个重要的因素[3]。无序的细胞增殖最终也会导致肿瘤的浸润与转移。现在大量的表明肿瘤相关的抑制基因如NM23、KAI1、 KISS1在肿瘤的浸润与转移中起到非常重要的作用[46]。
TMSG1是近年来新发现的一种新型肿瘤相关基因，已经发现在前列腺癌，肝癌，宫颈癌和胰腺癌中都有不同程度的表达。目前一些研究表明TMSG1的功能是抑制肿瘤的生长与浸润。Chen 等[7]在肝癌细胞系HCCLM3中通过质粒转染TMSG1研究发现其能够明显抑制肝细胞肿瘤的浸润与转移。Su等[8]研究发现高表达TMSG1的前列腺癌细胞系PE3M1E8的增殖，浸润能力明显被抑制。Tang等[9]研究发现在肝癌MHCC97L细胞系通过siRNA干扰下调TMSG1的表达能够明显增加细胞外氢离子的浓度，提示通过抑制TMSG1的表达和VATP酶的活性可能提高了细胞膜氢离子泵的转运功能从而增加了肿瘤细胞增殖与浸润的能力。但是TMSG1在胃癌中表达的临床意义及与患者的预后关系目前尚不十分清楚。
本研究采用免疫组织化学的方法检测了胃癌中TMSG1的蛋白的表达发现，胃癌中TMSG1的蛋白表达较胃良性组织中明显下降（P<0.05），说明在胃癌的发生过程中TMSG1的表达明显被抑制，这可能与肿瘤的增殖浸润有关。进一步分析TMSG1的蛋白表达与患者的临床病理因素的关系发现，TMSG1的蛋白表达与患者的淋巴结转移，肿瘤的分期密切相关（P<0.05），淋巴结转移组的TMSG1的蛋白表达及mRNA的表达明显低于淋巴结阴性组，且TNM分期愈晚其TMSG1的蛋白表达及mRNA的表达越下降，说明可能在肿瘤的进展过程中TMSG1的表达被显著抑制。在患者的预后分析中作者发现TMSG1的表达与患者的预后明显相关，TMSG1高表达患者的总生存期（OS）及无病生存期（PFS）明显高于TMSG1低表达组患者，在多因素生存分析中进一步表明TMSG1的表达是患者的一个独立预后因素，这与Wang等研究结果相同，TMSG1的表达的减少与缺失是膀胱癌肿瘤转移及无病生成期的一个独立预后标记，尤其在肿瘤的早期阶段它是一个非常重要的预后参考指标。
综上所述通过使用免疫组织化学分析TMSG1的蛋白的表达与患者的淋巴结转移，肿瘤的临床分期（TNM）及患者的预后密切相关，进一步证实了TMSG1的表达与胃癌的进展及预后密切相关，对判断临床患者的病情发展具有重要的指导意义。当然由于本实验的样本量较少，这仍然需要大样本前瞻性的实验来进一步证实，并且需要进一步了解TMSG1抑制肿瘤增殖浸润的具体调控机制，希望未来TMSG1能够成为治疗胃癌浸润转移的一个新的治疗靶点。
参 考 文 献
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